Glioblastoma hücre hattında (U87) siklopamin ve temozolomid kombine tedavisinin miR-20a ekspresyonu üzerine etkileri

Abstract

Amaç: Bu çalışmada, glioblastoma hücre hattında (U87) siklopamin ve temozolomid (TMZ) tedavisinin ayrı ayrı ve kombine olarak uygulanmasından sonra miR-20a ekspresyonunun araştırılması ve bu miRNA’nın glioblastoma tedavisindeki etkinliğinin değerlendirilmesi amaçlanmıştır. Gereç ve Yöntem: U87 MG, tedaviden önce 35 mm'lik kültür kabı üzerine yerleştirildi ve çoğaltıldı. Çalışma kapsamında 7 grup oluşturuldu: Grup 1: Kontrol grubu, Grup 2: Sham grubu (Dimetil sülfoksit), Grup 3: 2 Gün TMZ, Grup 4: 5 Gün TMZ, Grup 5: 3 saat siklopamin, Grup 6: 2 Gün TMZ + 3 saat siklopamin, Grup 7: 5 Gün TMZ + 3 saat siklopamin. Tedaviden sonra total miRNA izolasyonu ve qRT-PCR yapıldı. Bulgular: Glioblastoma hücre hattında miR-20a ekspresyonunun grup 3, grup 4, grup 5, grup 6 ve grup 7’de belirgin olarak azaldığı tespit edildi. Ancak bu azalmanın en fazla grup 7 de olduğu saptandı . Ek olarak grup 7’de hücre sayısının azaldığı görüldü. Sonuç: Glioblastoma hücrelerinde miR-20a’nın yüksek oranda eksprese olduğu; ancak siklopamin ve TMZ tedavilerinden sonra ekspresyonun azaldığı tespit edildi. miR-20a’nın glioblastoma için yeni bir terapötik hedef ve biyobelirteç olarak kullanılabileceği, siklopamin ve TMZ’nin glioblastomada tedavi amaçlı kullanılabileceği ancak bu konuda daha ileri çalışmaların yapılması gerektiği sonucuna varıldı.

Purpose: The aim of this study was to investigate miR-20a expression in glioblastoma cell line (U87) after applying cyclopamine and temozolomide (TMZ) treatment separately and in combination and to evaluate the efficiency of miR-20a in glioblastoma treatment. Materials and Methods: U87 MG was placed on a 35 mm culture dish before treatment. Within the scope of the study, 7 groups were formed: Group 1: Control group, Group 2: Sham group (Dimethyl sulfoxide), Group 3: 2 Days TMZ, Group 4: 5 Days TMZ, Group 5: 3 Hours Cyclopamine, Group 6: 2 Days TMZ + 3 Hours Cyclopamine, Group 7: 5 Days TMZ + 3 Hours Cyclopamine Total miRNA isolation and qRT-PCR was performed after treatment. Results: MiR-20a expression in the glioblastoma cell line was found to be significantly decreased in group 3, group 4, group 5, group 6 and group 7. However, it was determined that this decrease was highest in group 7. In addition, it was observed that the number of cells decreased in group 7. Conclusion: MiR-20a is highly expressed in glioblastoma cells; however, it was determined that the expressions decreased after Cyclopamine and TMZ treatments. miR-20a can be used as a new therapeutic target and biomarker for glioblastoma, Cyclopamine and TMZ can be used for treatment in glioblastoma, but further studies are needed on this subject.